Biochimie

EQUILIBRE ACIDO-BASIQUE: PHYSIOLOGIE ET EXPLORATION

INTRODUCTION :
L’équilibre acido-basique (EAB) est l’ensemble des mécanismes qui maintiennent à un niveau constant la concentration en ion H+ du milieu intérieur (exprimée en pH). Le pH du sang artériel d’un sujet normal est stable malgré l’agression acide continue, cette stabilité est indispensable au bon fonctionnement des protéines et à l’activité optimale des enzymes. D’ou’ l’importance vitale d’une régulation étroite du pH de l’organisme entre 7,35 et 7,45 qui va être assurée  par les systèmes tampons et deux organes : le poumon et le rein.
I/ GENERALITES
La concentration en ion H+ d’une solution correspond à son acidité, elle est appréciée par la mesure du pH :   pH = log 1/ [H+]. L’EAB résulte d’un bilan équilibré entre les entrées et les sorties d’ion H+ :
1/ Origine des ions H+ : sont de deux types ;
– Alimentation : riches en protides (végétaux sont surtout alcalins)
– Métabolisme :
+ Acides volatils : CO2 assimilé à un acide faible, produit par le métabolisme et éliminé par le poumon selon  un équilibre  nécessitant  l’anydrase carbonique (AC) :
CO2 +H2O   A C    H2CO3               H+ +HCO-3
+ Acidesfixes: de  concentration bien moins que CO2  mais très agressifs car ils  sont fortement dissociés, ils peuvent être organiques dont l’anion métabolisable (ac.lactique, corps cétoniques) ou minéraux  difficilement métabolises (ac.phosphorique, ac.sulfurique)
2/ Elimination des ions H+ : elle est assurée par deux voies :
-Le CO2  éliminé par le poumon (sortie rapide et massive d’ac.carbonique)
-L’élimination rénale des ac.fixes par réabsorption des bicarbonates en échange avec H+ et élimination des ion  H+ liés aux   acides fixes.
3/ Régulation de l’équilibre acido-basique :
Elle fait intervenir deux mécanismes :
-Le premier correspond à la mise en jeu des systèmes tampons.
-Lerelais est pris par l’intermédiaire de moyens physiques représentés par le poumon et le rein ensuite.
*Les systèmes tampons sont des substances qui tendent à minimiser  les variations de la concentration des ions H+ (pH,), c’est un acide ou une base faible non dissocié en équilibre avec sa forme dissociée.  Leur réaction est immédiate.Le système tampon des hydrogénocarbamates formé par H2CO3et HCO3- est le plus efficace du fait de sa bonne concentration plasmatique : 22 à 26 mmol/l, son pK  proche du pH de l’organisme  et de son caractère  ouvert grâce la régulation de la ventilation (l’élimination de l’ac.carbonique par le poumon par le maintient du PCO2 constante) :
CO2 + H2O↔H2CO3↔ H+ +  HCO3-
Ce tampon est soumis à un double contrôle  par deux systèmes régulateurs : le poumon et le rein .Le pH est donc selon l’Equation d’ Henderson Hasselbach :    
PH =  6,1 + log  [HCO3-]/aPCO2 = Rein/Poumon
Ce tampon va agir immédiatement comme  première ligne de défense, évitant une baisse rapide du pH mais son efficacité est limitée dans le temps car le sel tampon va être consommé. Il  y a d’autres tampons d’importance non négligeable comme les protéines sanguines, les phosphates sodiques et le système des hémoglobines au niveau des GR sans oublier les tampons intracellulaires de mécanisme encore mal connu.
*Les moyens physiques qui vont prendre le relais sont :
Poumon : son intervention est rapide par le contrôle respiratoire de la PCO2, les  centres respiratoires bulbaires sont très sensibles aux variations du PH, toute diminution du PH va entraîner  une hyper ventilation qui augmente l’élimination du CO2 et donc une diminution de la concentration des ions H+ selon: CO2  + H2O↔ H2CO3 ↔  H+  + HCO3-      
Cette  régulation reste limitée sur le plan anatomique, biochimique et physiologique et n’agit que sur la composante acide du système bicarbonate /acide carbonique.
Rein : son action est tardive mais  plus efficace et durable et agit aussi bien contre l’acidose que contre l’alcalose.Le rôle du rein dans l’ EAB est double :
·         Réabsorption des bicarbonates filtrés dans le tube proximale.
·         Elimination des ions H+ au niveau du tube contourné distale en échange avec un ion Na+,   à ce niveau  il y a une compétition entre H+ et K+ (du même au niveau cellulaire), ce qui explique  qu’une acidose sera  génératrice d’hyperkaliémie etréciproquement.Les ions  H+ sont sécrétés pour les 2/3 sous forme de NH4+  et le 1/3 sous forme phosphate diacide (acidité titrable), ce dernier est le tampon le plus important.
III/ EXPLORATION  BIOCHIMIQUE :
Le bilan de base  appelé GAZOMETRIE  comprend : PH, PCO2  et calcul de concentration du HCO3-, les paramètres d’oxygénation : PO2, Sa O2 .Un bilan complémentaire sera aussi demandé et comprend : l’Ionogramme sanguin (Na+, K+, CL-), mesure du Trou anionique, dosage des lactates sanguin et corps cétoniques urinaires
C’est une exploration demandée le plus souvent dans le cadre de la réanimation, elle constitue une urgence technique    :                                                                                                 
1/ Prélèvement :
Il se fait sur sang artériel par ponction directe au niveau d’une artere (fémorale, radiale), et  pour le nouveau né par prélèvement capillaire (pulpe de doigt).
On utilise une seringue à usage unique heparinée,la ponction et la conservation doivent être réalisées à l’abri de l’air(seringue hermétiquement fermée) : anaérobiose stricte( 1h max,sans choc,sans variation thermique)homogénéiser délicatement le sang avant la mesure(20à30s)tenir compte de la T°du malade ,de l’état de ventilation et de la pression atmosphérique. L’acheminent au laboratoire doit être rapide et le transport dans la glace.
2/ Mesure du PH sur sang total :
Se fait par méthode potentiométrique qui consiste en une  détermination d’une   différence  de potentiel (Ddp) entre une électrode de mesure en verre thermo statée à 37° et une électrode  de référence (électrode en platine plongée dans une solution d’ HCLO,1 M ( FIG  1 ).L’électrode de mesure est introduite dans la solution à mesurer ce qui donne  de part et d’autre de la membrane de verre une Ddp proportionnelle à la concentration en protons .(selon l’équation de Nernst :PH = E / K.P ,                            
E= Ddp, k : constante, P : pente de l’électrode.). Il est nécessaire de corriger les résultats rendus en fonction de la T° du malade (pH à T° du patient = pH à 37 ° -a (T- 37) ; a = 0,014).
 
 
 
FIG 1 : Électrode de verre pour la mesure du pH associée à une électrode de référence.
3/ Mesure de la PCO2 :  
Se fait grâce à l’électrode de Severinghaus  miniaturisée thermo statée (FIG. 2), le CO2 du spécimen à mesurer  diffuse à travers une membrane de téflon et fait varier le pH de la solution de bicarbonate, l’électrode de verre détecte cette variation, qui est proportionnelle à la concentration de CO2   de l’échantillon   à mesurer.
Valeurs physiologiques : 35 à 44 mm Hg au sang artériel (4,65 à 5,8 Kpa)
 
 
 
 
FIG 2 : Electrode de Severinghaus
4/ Mesure de la  pression partielle en O2 :
Se fait par  Ampérométrie   utilisant  l’électrode de Clark ( FIG. 3 ) , le principe  est basé sur  sur le fait qu’ une électrode  soumise à un potentiel constant fournit un courant directement proportionnel à la PO2 . L ‘O2 diffusant  à travers une membrane  de polypropyléne subit une réduction au niveau de la cathode, le débit d’électrons consommés est proportionnel à  PO2 (cette pression est en rapport avec O2 dissous et non pas celui combiné à l’hémoglobine). Enfin la PO2 est sensible à la température (si le prélèvement est conservé à 4° il doit être réchauffe à T° ambiante avant dosage) de même il faut tenir compte de la pression atmosphérique.   
Valeurs physiologique : 70 à 95 mm Hg  (sang artériel)   
 
 
 
FIG .3         Electrode de Clark.
5/ Autres paramètres :
*Taux de saturation de l’hémoglobine (Hb) en O2 : calculé par un microprocesseur inclus dans  l’automate d’analyse ;il est de 96٪ à 98٪  dans le sang artériel d’un adulte sain.
*Détermination des hydrogénocarbonate :  calculée à partir du PH et de PCO2  grâce à  l’équation d’ Henderson Hasselbach : PH = PKa  + log ( [HCO3-] / a PCO2 ) ; a :coefficient de solubilité de CO2   ;
Elle peut être aussi mesurée par méthode enzymatique (très utilisée sur les automates multiparamétriques) :
HCO3-   +  Phosphoénolpyruvate            oxaloacétate  + NADH, H+   ↔ malate +  NAD+        (Diminution de l’absorbance à 340 nm)
Les  valeurs normales : 22 à 26 mmHg.
*Autres paramètres biochimiques :
ü  l’ ionogramme sanguin par électrode sélective et mesure par potentiomètre directe ou directe ( Kaliémie , Chlorémie ) avec calcul du trou anionique : Mise en évidence de la présence d’anions indosés :TA = ( Na+  +  k+) _ (HCO3-  + CL – ), normalement vari de : 12 à 16 meq / l  .        
ü  Détermination  des lactates (méthode enzymatique) :.valeur normale : 1-2 mmol/l.
ü  Dosage des corps cétoniques (recherche urinaire à la bandelette).
IV – DES EQUILIBRES ACIDO-BASIQUES :
La connaissance  de  l’équation d’ Henderson  Hasselbach permet de voir que le PH est directement lié à la valeur : [HCO3-]  / a PCO2.
PH= 6,1 + log [HCO3-] /  a PCO2
Les bicarbonates du numérateur sont  d’origine métabolique et sont liés à la fonction rénale.La  PCO2 du dénominateur est d’origine respiratoire et sont liés à la fonction pulmonaire.Donc si le trouble initiale provient d’une variation de HCO3- ; il est dit métabolique et  si le  trouble initiale provient de la PCO2 ; il est dit  respiratoire.
La  compensation  en  cas  de  perturbation  a pour but de ramener  [HCO3-] / a PCO2  à sa valeur normale  et le PH à sa valeur de référence , on parle de trouble compensé. Si le PH reste en dehors des valeurs de référence malgré les tentatives de compensations il s’agit d’une perturbation décompensée.
Il y a différents tableaux cliniques qu’on peut regrouper dans quatre troubles :
1/ Acidose métabolique : le PH < 7 ,35    et diminution des bicarbonates < 22 mmol / l.
La compensation se fera par diminution de la PCO2 par hyperventillaton, il faut systématiquement  calculer  le trou anionique (TA)  lors de la recherche étiologique :
*Acidose métabolique  à TA normal : il y a perte d’HCO3- remplacée par le chlore (toujours hyperchlorémique), ceci peut se rencontrer  dans les  pertes digestive d’HCO3-, dans les  pertes rénales par défaut de réabsorption d’HCO3- ou de sécrétion d’ H+.
*Acidose métabolique à TA augmenté :il y a des acides fixes supplémentaires, la Chlorémie est normale ,ceci peut se voir en cas de surcharge acide exogène ( intoxication aux salicylés …),surcharge acide endogène ( acidocétose diabétique, acidose lactique ) ou de baisse des pertes rénales d’ H+ ( insuffisance rénale ).
2/ Acidose respiratoire : PH < 7 ,35 avec  PCO2 > 45  mmHg, la [HCO3-]  normale
La PO2  est abaissée par hypoventilation alvéolaire observée dans les insuffisance respiratoire (d’origine pariétale , parenchymateuse ou diverses ) ,il y a une hyperkaliémie modéré fréquente et la compensation se fait par élévation des bicarbonates plasmatique.
3/ Alcalose métabolique :PH > 7 ,45 avec augmentation des bicarbonates > 28 mmol/l.
La compensation se fait par augmentation de la PCO2  par hypoventilation. Les étiologies
Elles peuvent être une perte d’H+ (digestive ou rénale ) ou des surcharges en bases (exogène ou endogène) .
4/ Alcalose respiratoire : PH > 7 ,45 avec  hypocapnie :PCO2 < 35 mmHg et [ HCO3-] normal.
La compensation se fait par diminution des bicarbonates par diminution de la réabsorption rénale. Les étiologies sont multiples : hyperventilation par affection cérébrale, hypoxie d’altitude ou stress, hyperthermie maligne, baisse d’Hb ….  
CONCLUSION
L’équilibre acido-basique est l’ensemble des mécanismes qui maintiennent à un niveau constant  la concentration en ion H+ du milieu intérieur.
La mesure des paramètres  de l’EAB se pratique dans un contexte médical particulier : Bilan de réanimation indispensable. L’exploration acido-basique : Gazométrie est une Urgence technique  avec  prélèvement sanguin artériel anaérobie.
Les troubles acido-basiques sont majeurs et nécessitent un suivi biologique des malades  afin d’assurer une correction thérapeutique rapide. Les appareils actuels mesurent les gaz du sang, l’ionogramme et le taux d’Hb, donnant ainsi le maximum de renseignement.

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